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侖昌碩生物? 人神經(jīng)肽1（NK1）elisa試劑盒?? ?

廈門侖昌碩生物科技有限公司集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司，目前可提供各種抗體、免疫學相關(guān)的檢測試劑盒、胎牛血清，動物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務，涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領(lǐng)域。公司非常注重企業(yè)信息化的建設(shè)及企業(yè)平臺的建設(shè)，我們內(nèi)部采用了先進的信息處理平臺，保證客戶的需求可以準確、有效處理。公司成立之初，立足外貿(mào)，和部分歐美及亞非國的客戶建立了良好的合作，隨著國內(nèi)生物領(lǐng)域的蓬勃發(fā)展，逐步把重心轉(zhuǎn)移到國內(nèi)來，為每位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務是我們的使命。

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?1. 包被抗原：用包被液將抗原作適當稀釋, 一般為1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃溫育1小時后，4℃冰箱放置16～18小時。

?2. 洗滌：倒盡板孔中液體，加滿洗滌液，靜放三分鐘，反復三次，將反應板顛倒在吸水紙上，使孔中洗滌液流盡。

3. 加封閉液200微升，37℃放置一小時。

4. 洗滌同2。

5. 加被檢血清：用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,，每孔200微升。同時作稀釋液對照。37℃放置2小時。

6. 洗滌同2。

7. 加辣根過氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小時。

8. 洗滌同2。

9. 加底物：鄰*二胺溶液加200ml，室溫暗處10--15分鐘。

10. 加終止液：每孔50微升。

11. 觀察結(jié)果：用酶聯(lián)免疫檢測儀記錄450nm讀數(shù)。

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本研究旨在探討S100鈣結(jié)合蛋白A16 (S100 calcium binding protein A16, S100A16)在肝細胞脂質(zhì)代謝中的作用及可能的生物學機制.用脂肪酸培養(yǎng)HepG2細胞(人肝癌細胞系)以建立脂肪酸培養(yǎng)模型,對照模型不加脂肪酸培養(yǎng),每一模型分成3組細胞,分別用S100a16過表達質(zhì)粒,shRNA質(zhì)粒,Vector質(zhì)粒轉(zhuǎn)染.用試劑盒檢測細胞甘油三酯濃度,用油紅O染色觀察脂滴聚集情況,用免疫沉淀和質(zhì)譜分析尋找和S100A16相互作用的興趣蛋白,并用免疫共沉淀驗證,用Western blot和qRTPCR進行相關(guān)機制研究.結(jié)果顯示,和對照模型相比,脂肪酸培養(yǎng)模型細胞內(nèi)脂肪和甘油三酯濃度顯著增加.S100a16過表達組細胞內(nèi)脂肪積累顯著高于Vector質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組.熱休克蛋白A5 (heat shock protein A5, HSPA5)與S100A16之間存在相互作用.S100a16過表達可上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的HSPA5/肌醇依賴酶1α-X結(jié)合蛋白1 (inositol-requiring enzyme 1α-X binding protein 1,IRE1α-XBP1)通路相關(guān)蛋白(HSPA5,IRE1α和pIREα1)表達水平,并上調(diào)脂肪合成相關(guān)基因Srebp1c,Acc和Fas mRNA表達水平,而轉(zhuǎn)染S100A16 shRNA質(zhì)粒可使上述蛋白和mRNA水平低于Vector質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組.以上結(jié)果提示,S100A16可能通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激HSPA5/IRE1α-XBP1通路促進HepG2細胞脂合成.

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??廈門侖昌碩生物科技有限公司 本公司集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務及品牌代理為體的生物技術(shù)公司，目可提供各種抗體、免疫學相關(guān)的檢測試劑盒、胎牛血清、動物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務，涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學域。公司非常注重企業(yè)信息化的建設(shè)及企業(yè)平臺的建設(shè)，我們內(nèi)部采用了先進的信息處理平臺，保證客戶的需求可以準確、有效處理。公司成立之初，立足外貿(mào)，和部分歐美及亞非國家的客戶建立了良好的合作，隨著國內(nèi)生物域的蓬勃發(fā)展，逐步把重心轉(zhuǎn)移到國內(nèi)來，為每位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務是我們的使命。

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